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ブリルアン分光法の原理

ブリルアン分光法は、単色のレーザー光を試料に照射し、熱的に励起された音響フォノン(音波)による非弾性散乱光の、入射光からの振動数のずれを測定する分光法です。ずれは GHz 程度とラマン散乱の千分の一以下で、そこから音速、弾性率、粘弾性といった力学的性質が得られます。非接触・非破壊で、顕微鏡と組み合わせれば細胞や組織の硬さを3次元で測ることもできます。

励起レーザー(単一周波数) 音速 v で進む音波(音響フォノン) ストークス(ν₀ − νB) アンチストークス(ν₀ + νB) レイリー光

光散乱の種類
ブリルアン散乱とラマン散乱

光散乱には、振動数が変わらないレイリー散乱と、振動数が変わる非弾性散乱があります。非弾性散乱のうち、分子振動や光学フォノンによるものがラマン散乱(THz 領域)、音響フォノンによるものがブリルアン散乱(GHz 領域)です。

νS = ν0 − νB ストークスνAS = ν0 + νB アンチストークスν0:入射光(励起光)の振動数、νB:音響フォノンの振動数(ブリルアンシフト)

hνB が熱エネルギー kBT よりはるかに小さいため、ストークス線とアンチストークス線はほぼ同じ強さで現れます。この点はラマン散乱と大きく異なります。

GHz 領域(ブリルアン散乱)
ストークスアンチストークス −7.50+7.5周波数シフト(GHz、水・532 nm)
THz 領域(ラマン散乱)
−300+30周波数シフト(THz) レイリー線+ブリルアン線(重なる) ラマン線
模式図。レイリー線は縦軸を省略

散乱の運動学
エネルギーと運動量の保存

散乱の前後で、エネルギーと運動量の両方が保存されます。音響フォノンの振動数 Ω は光の振動数よりはるかに小さいので、散乱光の波数は入射光とほぼ等しくなります。

ωs = ωi ∓ Ω, ks = ki ∓ qq = 2ki sin(θ/2), ki = 2πn / λ0
Ω = v q → νB = 2 n vλ0 sinθ2n:試料の屈折率、v:音速、θ:散乱角、λ0:真空中の入射光の波長

後方散乱(θ = 180°)では νB = 2nv/λ0 となり、シフトは最大になります。顕微鏡測定の多くはこの配置です。

ki(入射光) ks(散乱光) q(フォノン) θ |ks| ≈ |ki| なので二等辺三角形になり、q = 2ki sin(θ/2)

音響フォノンによる
屈折率の周期変調

物質中では熱揺らぎによって、さまざまな方向と波長の音波が常に伝わっています。音波は密度の粗密をつくり、光弾性効果によって屈折率も周期的に変化します。この屈折率の縞は、光にとって音速 v で動く回折格子として働きます。

2 n Λ sin(θ/2) = λ0 ブラッグ条件νB = v / Λ ドップラーシフトΛ:音波の波長(縞の周期)

ブラッグ条件を満たす波長 Λ の音波だけが光を回折し、縞が動いているため回折光はドップラー効果で振動数が ±v/Λ ずれます。近づく音波からはアンチストークス光、遠ざかる音波からはストークス光が生じます。2式から Λ を消去すると、前のスライドの νB = (2nv/λ0) sin(θ/2) と一致します。

音速 v Λ 入射光 ν₀ 回折光 ν₀ ± νB 明るい帯:音波で屈折率が高くなった部分

ブリルアンシフトと弾性率

測定したシフト νB から縦波の音速が決まり、密度 ρ と組み合わせると縦弾性率(ロンジチューディナル・モジュラス)M が求まります。ピークの幅 ΓB は音波の減衰を表し、粘性に関係する損失成分を与えます。

v = λ0 νB2n (後方散乱)M′ = ρ v2, M″ = ρ v2 ΓBνBM′:貯蔵弾性率、M″:損失弾性率、ΓB:ピークの半値全幅、ρ:密度

例:水(ρ ≈ 997 kg/m³、v ≈ 1497 m/s)では M′ ≈ 2.2 GPa です。弾性率を求めるには n と ρ が必要ですが、生体試料では ρ/n² がほぼ一定とみなされることが多く、νB の変化が弾性率の変化の目安として使われます。

νB(音速 → M′) ΓB(減衰 → M″) ν₀ ν₀ + νB アンチストークス側のピーク(模式図)

ブリルアンシフトの大きさ

後方散乱で計算した典型値です。波長に直すとピコメートル程度のずれしかなく、ラマン散乱(532 nm 励起・1000 cm⁻¹ で約 30 nm)と比べて桁違いに小さいことが分かります。

7.5GHz
水・532 nm 励起
波数
0.25 cm⁻¹
波長のずれ
7.1 pm
条件
n = 1.334、v = 1497 m/s
5.1GHz
水・780 nm 励起
波数
0.17 cm⁻¹
波長のずれ
10.4 pm
条件
n = 1.329、v = 1497 m/s
32.8GHz
石英ガラス・532 nm 励起
波数
1.09 cm⁻¹
波長のずれ
30.9 pm
条件
n = 1.461、v = 5968 m/s
IASIS ≈ exp(− h νBkBT) ≈ 0.999 (水・7.5 GHz、300 K)hνB/kBT ≈ 0.0012、フォノンの平均占有数は約 830。ストークス線とアンチストークス線の強さはほぼ等しくなります。

ブリルアン分光装置の構成

  • 1
    単一周波数レーザーシフトが GHz と小さいため、線幅がブリルアン線幅より十分狭く、周波数が安定した単一縦モードの光源が必要です。
  • 2
    吸収セル(ノッチフィルタ)ヨウ素やルビジウムの蒸気セルで、励起波長の弾性散乱光(レイリー光や反射光)だけを吸収して取り除きます。
  • 3
    高分解能・高コントラスト分光器タンデム・ファブリーペロー干渉計(コントラスト 10¹⁰ 以上)や、高速に測れる VIPA 分光器を使います。回折格子の分光器では分解能が足りません。
レーザー 単一周波数 ビームスプリッタ 対物レンズ 試料 吸収セル(I₂ / Rb) 分光器 タンデムFPI / VIPA 検出器 エタロン 散乱光

励起光源と波長の選択

散乱強度は波長の4乗に反比例し、ブリルアンシフトは波長に反比例します。短波長ほど信号は強くシフトも大きくなりますが、生体試料では光毒性や吸収を考えて長波長を選ぶこともあります。弾性散乱光を取り除く吸収セルの有無も、波長を選ぶ要因になります。

532nm
高い散乱効率・大きなシフト
散乱強度(532 nm = 1)
水での νB
7.5 GHz
相対強度
1
吸収セル
ヨウ素(I₂)
660nm
生体試料での光毒性を抑える
散乱強度(532 nm = 1)
水での νB
6.0 GHz
相対強度
約 0.42
吸収セル
—
780nm
生体顕微鏡での利用が多い
散乱強度(532 nm = 1)
水での νB
5.1 GHz
相対強度
約 0.22
吸収セル
ルビジウム(D₂線)

いずれの波長でも、線幅がブリルアン線幅(水で数百 MHz 程度)より十分狭い単一縦モード発振と、高い周波数安定性が必要です。周波数のドリフトはそのままシフトの測定誤差になり、吸収セルを使う場合は吸収線に波長を合わせ込む必要があります。

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